支氣管哮喘是一種氣道慢性炎癥性疾病，Th2 細 胞在誘導和維持免疫炎癥過程中起重要的作用。 Th2 細胞 主 要 分 泌 白 細 胞 介 素-8 （IL-8）、腫 瘤 壞 死 因 子-α（TNF -α）等 促 進 IgE 的 合 成 、嗜 酸 性 粒 細 胞 （EOS）的生 長 與 分 化，以 及 黏 液 分 泌 、氣 道 高 反 應 （AHR）的發生。 氣道平滑肌細胞（ASMCs）具有收縮功 能及分泌功能，能分泌趨化因子、細胞因子等多種炎 性介質，對氣道炎癥的發生及發展起著重要的作用。研 究表明，與哮喘發生有關的 Th2 型細胞因子 IL-8 及趨化因子 TNF-α 等在 ASMCs 上均有表達，它們在參與氣道炎癥的發生、EOS 的生長與分化以及 AHR 的發生過程中均起重要作用。

阿奇霉素注射液（蘇州長征-欣凱制藥有限公司， 生產批號：121128）；地塞米松磷酸鈉注射液（辰欣藥 業股份有限公司，生產批號：1210206432）；雞卵白蛋 白（OVA）（Ⅱ、Ⅴ級）（上海研生生化試劑有限公司）； DAB 顯色試劑盒[生工生物工程（上海）有限分公司]； 多聚賴氨酸（北京格瑞納健峰生物技術有限公司）；大 鼠 IL -8、TNF -α 酶 聯 免 疫 吸 附 測 定 （ELISA） 試 劑 盒（美 國 R&D 公司）；402Ai 超聲 霧 化 器（上 海 魚 躍 醫 療 設 備 有 限 公 司）；FA1004 型微量電子天平 （精 度：0.1 mg， 上海賽德利思精密儀器儀表有限公司）； QL-902 漩渦混懸器 （海門市其林貝爾儀器制造有限 公司）；AXTGL16M 高速低溫離心機 （上海趙迪實驗室儀器設備有限公司）；普通光學顯微鏡（ 蘇州耀宏光電科技有限公司 ） ；Qwin550w 型計算機病理圖 像分析系統（德國 LeicaQwin公司）。

6～8 周齡 的 BALB/c 小鼠 共 32 只 ，雌性 ，體 重 20～25 g，購自濰坊醫學院（以下簡稱“我校”）實驗動 物中心。清潔喂養，環境溫度控制在 22～25℃，環境濕度 控制在 40%～70%，進水不限，喂養食物中不含 OVA。本研究經我校動物試驗倫理委員會審核并予以批準。

32 只小鼠采用隨機數字表法分為四組：A 組，生 理鹽水對照組；B 組，哮喘組；C 組，阿奇霉素干預組； D 組，地塞米松干預組。每組 8 只小鼠。清潔級復制哮 喘模型：分別于第 0、7、14 天，予 B、C、D 組小鼠腹 腔注 射 OVA 25 μg+Al（OH）3 1 mg。 致敏 1 周后 第 21～26 天， 將小鼠置于透明玻璃容器中，2% OVA 生 理鹽水溶液霧化吸入。A 組予等量生理鹽水代替 OVA 致敏和激發。各組小鼠均每天激發 1 次，30 min/次，激 發 6 d。 B 組激發后未予任何藥物干預。 C 組于第 14天 起，霧化吸入 1 h 后皮下注射阿奇霉素 0.4 mg/mL，連 續 7 d。 D 組于第 14 天起，霧化吸入 1 h 后皮下注射 地塞米松磷酸鈉 2 mg/kg，連續 7 d。

激發后 24 h （第 27 天），處 死 小 鼠，打 開 小 鼠 胸 腔 取 右 肺 組 織， 10%中性甲醛固定，脫水、包埋，制作蠟塊，病理切片， 進行蘇木精-伊紅（HE）染色，100×光鏡下觀察肺組織 結構。

激發 后 24 h（第 27 天），各組小鼠 用 37℃生理鹽 水 1 mL 進行肺灌洗，反復 3 次，收集左肺支氣管肺泡灌洗液 （BALF），采用 ELISA 法檢測 IL-8、TNF-α、嗜酸性粒 細胞計數及白細胞計數。 試驗步驟嚴格按照試劑盒說 明書進行。

采用 SPSS 13.0 統計軟件對數據進行分析，計量 資料以均數±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因 素方差分析，兩兩比較采用 LSD-t 檢驗，以 P ＜ 0.05 為差異有統計學意義。

B 組小 鼠 于 霧 化 激 發 時 出 現 煩 躁 不 安、抓 耳 撓 腮、呼吸急促、打噴嚏、流涎、大小便失禁、腹肌強直等 哮喘反應；而 C 組及 D 組霧化激發時上述反應均減輕； A 組幾乎無任何反應。

A 組小鼠氣道黏膜無增厚，氣道周圍無炎癥細胞 浸潤，肺泡壁結構完整；B 組小鼠氣道黏膜充血水腫， 氣道周圍較多炎癥細胞浸潤，肺泡結構被破壞；C 組 小鼠氣道周圍少量炎癥細胞浸潤，管壁無明顯增厚； D 組小鼠程度與 C 組小鼠相似。 見圖 1（封四）。2.3 各組小鼠 BALF 中白細胞總數和 EOS 百分比的 比較 與 A 組比 較，B 組小 鼠 BALF 中白 細 胞 總 數 和 EOS 百分比均顯著升高，差異有高度統計學意義（P ＜ 0.01）。 與 B 組比較，C 組和 D 組小鼠 BALF 中白細胞 總數及 EOS 百分比明顯降低，差異有高度統計學意 義（P ＜ 0.01）。C、D 兩組白細胞總數和 EOS 百分比比較， 差異無統計學意義（P ＞ 0.05）。 見表 1。

3 討論

既往研究發現，在慢性哮喘患者和動物模型中均 存在氣道上皮脫落、氣管周圍炎癥細胞浸潤、AHR 等 改變。 炎性細胞因子（如 IL-8、TNF-α﹚是目前用于 判斷氣道炎癥的主要指標。 氣道炎癥被認為是哮喘的 本質，T 細胞在控制氣道炎性反應中起重要作用，Th1/ Th2 細胞比例失衡，Th2 型細胞因子分泌增多在氣道 炎癥的形成中發揮重要作用。 本研究發現：哮喘 組小鼠支氣管肺泡灌洗液中 IL-8 和 TNF-α 濃度均 較正常對照組明顯降低。 與既往研究結果相符。綜上所述，本研究發現阿奇霉素可以抑制 IL-8、 TNF-α 的表達，阻礙 Th2 型細胞因子的生成，緩解氣 道炎癥。